Kloning cDNA Disulfide Isomerase (PDI) dari Kedelai (Glycine max L) Varietas Argomulyo ke dalam Vektor pTA2

Untuk mengatasi penyakit karat pada tanaman kedelai (Glycine max L.) perlu dilakukan pemuliaan tanaman dengan menghasilkan varietas-varietas unggul. Untuk mendapatkan varietas baru pada tanaman, maka perlu dilakukan analisis dan kajian luas mengenai karakterisasi suatu tanaman. Salah satu karakter yang perlu dipelajari adalah gen-gen yang terlibat dalam proses ketahanan tersebut. Untuk memahami gen tertentu, dilakukan dengan proses cloning gen. Penelitian ini bertujuan untuk mengklon cDNA Disulfide Isomerase dan mengkarakterisasi signal peptide dan domain protein Disulfide Isomerase dari kedelai varietas Argomulyo. Penelitian ini merupakan penelitian deskriptif. Tahapan dalam penelitian terdiri dari pengklonan cDNA Disulfide Isomerase ke dalam vektor pTA2. Analisis sisipan dilakukan dengan menggunakan enzim restriksi dan selanjutnya disekuensing. Analisis hasil sekuensing digunakan untuk menganalisis keberadaan kompenen penting seperti start codon dan stop codon (Basic Local Alignment Search Tool). Hasil sekuensing juga digunakan untuk menganalisis secara insilico keberadaan signal peptide dan domain khusus yang terdapat pada sequence protein Disulfide Isomerase. Penelitian ini berhasil mengklon cDNA Disulfide Isomerase ke dalam vektor pTA2. Hasil sekuensing menunjukkan bahwa sekuen nukleotida insert (termasuk start codon dan stop codon) memiliki kesamaan 100% dengan sequence cDNA Disulfide Isomerase dari database NCBI. Analisis secara in-silico menujukkan bahwa protein Disulfide Isomerase memiliki signal peptide pada posisi asam amino 1-30. Kemudian, analisis domain menunjukkan bahwa protein Disulfide Isomerase mengkode domain thioredoxin